最近幾年,有關(guān)胎腦凍存的低溫生物學(xué)研究進展較快,實驗表明,凍存成活的關(guān)鍵技術(shù)是速率降溫。
自增壓液氮罐
目前,速率降溫設(shè)備結(jié)構(gòu)復(fù)雜,價格昂貴。為探索一種簡易、有效的速率降溫方法,我們對液氮罐內(nèi)液氮氣相溫層進行了分析研究,發(fā)現(xiàn)其氣相溫度的溫層與罐內(nèi)深度呈指數(shù)關(guān)系,利用這種關(guān)系設(shè)計了一種簡易降溫方法,并進行了胎腦細胞凍存的實驗觀察,現(xiàn)報告如下。
材料與方法
首先(第一次)將液氮充入液氮罐(液氮生物容器廠生產(chǎn)YDS-10)內(nèi)40mm深(液氮在液氮罐內(nèi)的液相深度),加蓋靜置24小時,去蓋換上自制的鋼質(zhì)連接體,固定升降桿,連接低溫監(jiān)測儀(法國產(chǎn),范圍+200℃至一300℃,精度1℃),從液氮罐口下+4℃溫層開始向下依次每隔smm測定一個溫度,每次以達到平衡溫度為準(zhǔn),一般需停留8至12秒,將結(jié)果列表記錄;第二次充入液氮200mm深,方法同第一次,并將結(jié)果做統(tǒng)計學(xué)處理。
另取12例4至6個月水囊引產(chǎn)胎兒,用王氏改良法制取胎腦細胞標(biāo)本岡,用方氏法凍融胎腦細胞標(biāo)本圖,l%臺酚藍染色鑒定凍前及凍后1周的細胞成活率,并做快速凍存對比。
自增壓液氮罐