低溫冷凍保存不會降低胚胎發(fā)育潛能,是保存女性生育力安全有效的方法。不同的胚胎凍融方法對胚胎完整率也有影響,玻璃化冷凍胚胎復(fù)蘇后胚胎卵裂球完整性更好,具有更高的發(fā)育潛能。
進(jìn)行配子或胚胎保存的目的是希望經(jīng)過冷凍和復(fù)蘇后,配子或胚胎仍能保持其生物學(xué)活性。胚胎或配子在-196℃的液氮中10年也不會退化,但由于來自環(huán)境中的大量輻射,也可能導(dǎo)致DAN損傷。冷凍保護(hù)劑的毒性作用、滲透性休克、細(xì)胞內(nèi)冰晶形成等各種危險因素對細(xì)胞正常新陳代謝、生理活動的損傷及胚胎保存過程中液氮內(nèi)可能聚集的病毒對胚胎安全性也存在一定的威脅。妊娠是評價胚胎發(fā)育潛能的最佳指標(biāo)。通過研究2005-2012年867個凍融胚胎移植周期,3367枚胚胎情況,按冷凍保存時間分為4組:12~23個月、24~35個月、36~48個月>48個月,發(fā)現(xiàn)胚胎存活率、囊胚形成率、種植率、妊娠率、單胎嬰兒出生體重各組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,認(rèn)為不同的胚胎儲存時間不影響胚胎發(fā)育潛能.研究亦顯示:胚胎冷凍保存時間不影響妊娠率、活產(chǎn)率及流產(chǎn)率,只有卵子年齡、胚胎存活率及移植胚胎數(shù)目影響妊娠率。本中心通過分析胚胎冷凍保存時間與臨床妊娠結(jié)局的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)不同胚胎冷凍保存時間組的臨床妊娠率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,故認(rèn)為胚胎冷凍時間的延長并不能降低胚胎發(fā)育及種植潛能,有再生育愿望的患者若有冷凍保存胚胎,應(yīng)首先實施冷凍胚胎復(fù)蘇后移植。
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不同的胚胎凍融方法對胚胎完整率也有影響,玻璃化冷凍胚胎復(fù)蘇后胚胎卵裂球完整性更好,具有更高的發(fā)育潛能。有學(xué)者通過研究126個凍融胚胎移植周期發(fā)現(xiàn):胚胎卵裂球無損傷組臨床妊娠率為37.18%,種植率為23.72%,流產(chǎn)率為3.45%;部分卵裂球損傷組臨床妊娠率為33.33%,種植率為13.85%,流產(chǎn)率為12、50%;兩組相比,臨床妊娠率差異無統(tǒng)計學(xué)意義,但種植率與流產(chǎn)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義。認(rèn)為部分卵裂球損傷能降低胚胎種植潛能,卵裂球完整性是影響臨床妊娠率的關(guān)鍵。本研究中600個凍融胚胎移植周期,共復(fù)蘇1680枚胚胎,其中5枚卵裂球從透明帶中脫出而死亡,9枚卵裂球存在1~2個卵裂球死亡情況,胚胎完整率為99.16%。胚胎完整率高可能是導(dǎo)致凍融胚胎臨床妊娠率不低于新鮮胚胎臨床妊娠率的原因。
研究顯示:在玻璃化冷凍中應(yīng)用冷凍載桿(薄膜)與冷凍環(huán)相比,胚胎存活率均大于90%,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,囊胚形成率分別為31、5%和16.1%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。認(rèn)為冷凍載桿應(yīng)用方便,胚胎不容易丟失,有更好的發(fā)育能力,值得廣泛應(yīng)用。本中心自2010年開展玻璃化冷凍以來,曾使用過冷凍環(huán)與冷凍載桿兩種載體,也發(fā)現(xiàn)冷凍載桿既使用方便又能保證胚胎安全,因此目前全部應(yīng)用載桿為胚胎載體。
首次凍融胚胎移植不孕的患者常擔(dān)心自己再次移植時成功率會降低,往往心理壓力較大。而本研究發(fā)現(xiàn):第1次、第2次、第3次及≥第4次以上的凍融胚胎移植周期臨床妊娠率分別為55.29%、56.39%、47.88%和47.05%,4組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這說明多次實施凍融胚胎移植的患者每次移植均具有相同的懷孕幾率,與隨著移植周期數(shù)的增加,部分反復(fù)不孕患者增加了移植胚胎數(shù)目有關(guān)。
綜上所述,胚胎冷凍保存時間的增加不影響胚胎發(fā)育潛能,胚胎玻璃化冷凍是保存女性生育力安全有效的方法。
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