關(guān)于液氮罐復(fù)蘇樣品的方法三:
使用Nunc 凍存管,機(jī)械密封的凍存管必須密封在保護(hù)袋中。Nunc 提供CryoFlex 密封管,熱密封的聚乙烯管專門為Nunc 凍存管密封設(shè)計(jì)。將凍存管在液氮液相中凍存而沒有使用CryoFlex 密封管是十分危險(xiǎn)的,凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進(jìn)行熱密封。
警告:不要使用Nunc 的凍存管在液氮液相,除非正確的將凍存管密封在NuncCryoFlex Tubing (Cat. No. 343958)中。若不正確使用凍存管,液氮會(huì)進(jìn)入凍存管中導(dǎo)致壓力上升,發(fā)生爆炸或者生物泄漏安全事故。正確使用方法可以參考NalgeNunc International Cryopreservation Manual。
當(dāng)凍存管儲(chǔ)存在液氮液相中而沒有使用CryoFlex Tubing 時(shí),復(fù)蘇時(shí)應(yīng)將凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃?chǔ)存24h,這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸,從而降低凍存管中的壓力。等在液氮?dú)庀鄡?chǔ)存24h 后,將凍存管放入水浴槽,同時(shí)用毛巾覆蓋,等熔融復(fù)蘇結(jié)束后轉(zhuǎn)移凍存物。此方法也可在方法一及方法二中作為前處理使用。
整個(gè)操作過程中必須穿戴保護(hù)服,包括手套,臉罩等。
純屬個(gè)人經(jīng)驗(yàn),希望對大家有所幫助。